Грам петно: как се прави и за какво е

Съдържание

• Как се прави оцветяване по Грам
• За какво е

Грам оцветяване или просто Грам е бърза и проста техника, която има за цел да диференцира бактериите според характеристиките на клетъчната им стена след излагане на различни багрила и разтвори.

По този начин, чрез оцветяване по Грам, е възможно да се провери, освен формата на бактериите, цвета, който те придобиват, и този резултат е важен за определяне на други стратегии за идентифициране на бактериалните видове и за лекаря да посочи превантивно лечение според микроскопски наблюдаваните характеристики.

Оцветяването по Грам обикновено се извършва рутинно в лабораторията и е част от изпита за бактериоскопия. Разберете какво е бактериоскопия и как се прави.

Как се прави оцветяване по Грам

Грам оцветяването е бърз, практичен и евтин метод за идентифициране на бактерии, отговорни за инфекции, като е полезен за лекарите да посочат превантивно лечение на инфекцията, която може да се появи, тъй като са известни специфичните характеристики на тези групи бактерии,

Оцветяването по Грам се извършва в 7 основни стъпки, но протоколът може да варира в зависимост от лабораторията:

1. Поставете няколко колонии от бактерията върху пързалката, като добавите капка вода, за да улесните хомогенизирането на колониите;
2. Оставете го да изсъхне малко и острието може бързо да премине през пламъка, за да благоприятства сушенето, но е важно да се обърне внимание на температурата, тъй като ако температурата е твърде висока, е възможно да има промяна в структурата на бактерии, които могат да попречат на резултата от изпита;
3. Когато предметното стъкло изсъхне, покрийте с виолетово кристално багрило и го оставете да действа за около 1 минута;
4. Измийте предметното стъкло с струя течаща вода и покрийте пързалката с лугол, който има за цел да фиксира синьото багрило, и го оставете да действа в продължение на 1 минута. И двата вида бактерии могат да абсорбират комплекса, образуван от багрилото и лугола, като стават сини;
5. След това измийте пързалката с течаща вода и нанесете 95% алкохол, оставяйки да действа 30 секунди. Алкохолът е отговорен за разтварянето на липидната мембрана, която образува грам-отрицателни бактерии и по този начин премахва комплекса, образуван между багрилото и лугола, обезцветявайки тези бактерии. Въпреки това, в случай на грам-положителни бактерии, алкохолът дехидратира клетъчната стена на грам-положителните бактерии, като кара порите да се свиват и ги прави непропускливи;
6. След това измийте отново в течаща вода и покрийте пързалката с второто багрило, фуксин или сафранин и оставете да действа в продължение на 30 секунди;
7. След това измийте пързалката под течаща вода и я оставете да изсъхне при стайна температура.

Веднага след като плъзгачът изсъхне, е възможно да поставите капка потапящо масло и да наблюдавате плъзгача под микроскопа със 100x обектив, като е възможно да се провери наличието или отсъствието на бактерии, както и наличието на дрожди и епителни клетки.

За какво е

Главното оцветяване има основната цел да диференцира бактериите според характеристиките на клетъчната стена и общата морфология. По този начин, според характеристиките, наблюдавани под микроскопа, бактериите могат да бъдат класифицирани в:

• Грам-положителни бактерии, които се визуализират със син цвят поради факта, че не се обезцветяват от алкохол, тъй като имат по-дебела клетъчна стена и порите им се свиват при излагане на лугол;
• Грам-отрицателни бактерии, които се визуализират с розов / лилав цвят поради факта, че са обезцветени от алкохол и оцветени от сафранин или фуксин.

След разглеждане на бактериите под микроскоп е възможно да бъдат проведени допълнителни тестове в лабораторията, за да се идентифицират видовете бактерии. Чрез Грама и връзката с признаци и симптоми, представени от лицето, лекарят може да посочи превантивно лечение, докато не се получи резултатът от по-специфични изследвания, тъй като по този начин е възможно да се намали скоростта на бактериална репликация и да се предотвратят усложнения.