Електрофореза: какво представлява, за какво служи и как се прави

Съдържание

• За какво е
• Как се прави
• Видове електрофореза
• 1. Електрофореза на хемоглобина
• 2. Протеинова електрофореза

Електрофорезата е лабораторна техника, извършена с цел разделяне на молекулите според техния размер и електрически заряд, така че да може да се направи диагностика на заболяванията, да се провери експресията на протеини или да се идентифицират микроорганизми.

Електрофорезата е проста и евтина процедура, която се използва в лабораторна рутина и в изследователски проекти. Според целта на електрофорезата може да се наложи провеждането на други тестове и изследвания, за да се достигне например до диагноза.

За какво е

Електрофорезата може да се извършва за различни цели, както в изследователски проекти, така и при диагностика, тъй като това е проста и евтина техника.По този начин електрофорезата може да се извърши за:

• Идентифицирайте вируси, гъбички, бактерии и паразити, като това приложение е по-често в изследователски проекти;
• Тест за бащинство;
• Проверете експресията на протеини;
• Идентифицирайте мутации, които са полезни при диагностицирането на левкемия например;
• Анализирайте видовете циркулиращ хемоглобин, които са полезни при диагностицирането на сърповидно-клетъчна анемия;
• Оценете количеството протеини, налични в кръвта.

Според целта на електрофорезата може да се наложи провеждането на други допълнителни изследвания, за да може лекарят да завърши диагнозата.

Как се прави

За извършване на електрофореза се изисква гелът, който може да бъде полиакриламид или агароза в зависимост от целта, буфер за електрофореза и вана, маркер за молекулно тегло и флуоресцентен багрил, в допълнение към UV или LED светлинно оборудване, известно още като трансиллюминатор.

След приготвянето на гела трябва да се постави конкретен предмет, така че кладенците да се направят в гела, наричан популярно гребен, и да оставят гела да стегне. Когато гелът е готов, просто нанесете веществата в ямките. За това в една от ямките трябва да се постави маркер за молекулно тегло, положителен контрол, който е веществото, което е известно какво представлява, отрицателен контрол, който гарантира валидността на реакцията, и пробите, които трябва да бъдат анализирани. Всички проби трябва да се смесват с флуоресцентно багрило, тъй като по този начин е възможно да се визуализират лентите на трансилуминатора.

Гелът с пробите трябва да се постави в каната за електрофореза, която съдържа специфичния буферен разтвор, и след това устройството се включва, така че да има електрически ток и, следователно, потенциална разлика, което е важно за разделящите частици според тяхното натоварване и размер. Електрофоретичното време на работа варира в зависимост от целта на процедурата и може да продължи до 1 час.

След определеното време е възможно да се види резултатът от електрофоретичното преминаване през трансилуминатора. Когато гелът се постави под UV или LED светлина, е възможно да се визуализира моделът на ивиците: колкото по-голяма е молекулата, толкова по-малка е нейната миграция, като се приближава до кладенеца, докато колкото по-лека е молекулата, толкова по-голям е миграционният потенциал.

За да бъде валидирана реакцията, лентите на положителната контрола трябва да се визуализират и нищо не трябва да се визуализира в отрицателната контрола, тъй като в противен случай това е индикация, че е имало замърсяване и целият процес трябва да се повтори.

Видове електрофореза

Електрофорезата може да се извършва за различни цели и според нейното предназначение могат да се използват няколко вида гел, като най-често срещаните са полиакриламид и агароза.

Електрофорезата за идентифициране на микроорганизми е по-често да се извършва в изследователски лаборатории, но за диагностични цели електрофорезата може да се използва за идентифициране на хематологични заболявания и заболявания, които се развиват с увеличаването на количеството протеини, като основните видове електрофореза:

1. Електрофореза на хемоглобина

Електрофорезата на хемоглобина е лабораторна техника, извършена за идентифициране на различните видове хемоглобин, циркулиращи в кръвта, което дава възможност да се идентифицира наличието на заболявания, свързани със синтеза на хемоглобин. Видът на хемоглобина се идентифицира чрез електрофореза при специфично рН, в идеалния случай между 8,0 и 9,0, с модел на ленти, които могат да бъдат сравнени с нормалния модел, което позволява идентифицирането на анормални хемоглобини.

За какво е създаден: Електрофорезата на хемоглобина се извършва за изследване и диагностициране на заболявания, свързани със синтеза на хемоглобин, като сърповидно-клетъчна анемия и хемоглобинова С болест, освен че е полезна при диференцирането на таласемия. Научете как да тълкувате електрофорезата на хемоглобина.

2. Протеинова електрофореза

Протеиновата електрофореза е изпит, поискан от лекаря, за да се оцени количеството протеини, циркулиращи в кръвта, и по този начин да се идентифицират заболявания. Това изследване се извършва от кръвна проба, която се центрофугира, за да се получи плазмата, частта от кръвта, състояща се, наред с други вещества, от протеини.

След електрофореза може да се визуализира модел на ленти и впоследствие графика, в която е посочено количеството на всяка фракция протеини, което е от основно значение за диагнозата.

За какво е създаден: Електрофорезата с протеини позволява на лекаря да изследва появата на множествен миелом, дехидратация, цироза, възпаление, чернодробно заболяване, панкреатит, лупус и хипертония според модела на лентата и графиката, представена в доклада за изследване.

Разберете как се прави и как да разберете резултата от протеиновата електрофореза.